ການວິນິດໄສໂມເລກຸນ: ທີ່ແທ້ຈິງ, ທີ່ໃຊ້ເວລາ PCR

ໃນປັດຈຸບັນ, ກົນໄກການວິນິດໄສໂມເລກຸນອອກແບບລະບົບຕ່ອງໂສ້ຕິກິຣິຍາໂພລິເມີ (PCR), ເຊິ່ງແມ່ນຍູ້ແຮງສໍາລັບການພັດທະນາຂອງຈໍານວນຂອງ ວິທີການຂອງການບົ່ງມະຕິ ພະຍາດ, ໂດຍອີງໃສ່ການຕັດສິນໃຈຂອງສານພັນທຸກໍາໄດ້. ສໍາລັບການດໍາເນີນການທີ່ແທ້ຈິງ, ທີ່ໃຊ້ເວລາສໍາເລັດໂຄງການນໍາໃຊ້ຊິ້ນ gene (ໂດຍສະເພາະ ອາຊິດນິວຄລີອິກ) ຂອງຕົວແທນສາເຫດ, ຊຶ່ງກໍບໍ່ແມ່ນພົບເຫັນຢູ່ໃນບຸກຄົນອື່ນ.

ຫຼັກການຂອງການສໍາເລັດໂຄງການແມ່ນຫຼາຍປະການຂອງການສະເພາະໃດຫນຶ່ງລ້ານຊິ້ນເຊື້ອພະຍາດ DNA ຂອງເວລາໂດຍ polymerase DNA ໃນຫນ່ວຍງານພິເສດ, ເອີ້ນວ່າ cycler ຄວາມຮ້ອນ, ເຊິ່ງສະຫນອງການຄ້າງຫ້ອງທີ່ cyclic ຂອງລະບອບອຸນຫະພູມສໍາລັບໂຄງການໃດຫນຶ່ງ.

ການບົ່ງມະຕິ PCR ອະນຸຍາດໃຫ້ກັບຄືນມາຂອງການຂະຫຍາຍການ, ບໍາລຸງຮັກສາກິດຈະກໍາ enzyme ໄດ້. ໃນເວລາທີ່ການຂະຫຍາຍການໃຊ້ເວລາສະຖານທີ່ມົນ, ໃນຫນຶ່ງຂອງວົງຈອນຈໍານວນຂອງການສໍາເນົາຂອງສິ້ນໂດຍສະເພາະຂອງ DNA ຂອງຄູ່ເຊື້ອພະຍາດ, ຫຼັງຈາກສາມສິບຮອບວຽນ - ເປັນຮ້ອຍແລະສິບ. ນັ້ນຄືເຫດຜົນ PCR ຖືກນໍາໃຊ້ໃນການບົ່ງມະຕິທີ່ຈະກໍານົດເຊື້ອພະຍາດພຽງພໍຂະຫນາດນ້ອຍ, ການກໍານົດຂອງຊຶ່ງເປັນໄປບໍ່ໄດ້ໂດຍບໍ່ມີມັນ.

ຄວນຈະໄດ້ຮັບຍົກໃຫ້ເຫັນວ່າ RNA ບໍ່ສາມາດຈະແມ່ແບບສໍາລັບ PCR ໃນທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງໄດ້. ດັ່ງນັ້ນ, ໃນຄໍາສັ່ງທີ່ຈະກວດສອບເອັນເອໄວລັດກ່ອນທີ່ຈະຂະຫຍາຍການເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຮັບ DNA ລັກສະນະຮ່ວມກັບຊິ້ນທີ່ສອດຄ້ອງກັນຂອງມັນ. ຕິກິຣິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ໂພລິເມີອະນຸຍາດໃຫ້ຜະລິດ DNA ແລະ RNA ເຊື້ອພະຍາດການວັດແທກ. ຂໍ້ມູນທີ່ໄດ້ຮັບດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການຕິດຕາມກວດກາປະສິດທິຜົນຂອງການປິ່ນປົວດ້ວຍນໍາໃຊ້, ແລະການປະເມີນຜົນຂອງ prognosis ທາງດ້ານການຊ່ວຍໄດ້.

ໃນນອກຈາກນັ້ນ, ທີ່ແທ້ຈິງ, ທີ່ໃຊ້ເວລາ PCR ບໍ່ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການປະຕິບັດເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບການຖອດລະຫັດຂອງ DNA ເປົ້າຫມາຍດັ່ງກ່າວຫຼື amplicons, ເຊິ່ງໃຫ້ບໍລິການເປັນອຸປະສັກໃຫ້ການບົ່ງມະຕິກ່ຽວກັບການແລະນໍາໄປສູ່ການຜົນໄດ້ຮັບທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ. ວິທີນີ້ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນໄປໄດ້ທີ່ຈະບໍ່ນໍາໃຊ້ຂັ້ນຕອນ electrophoresis, ຊຶ່ງນໍາໄປສູ່ການຜະລິດຕະພັນຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການຫຼຸດຜ່ອນການຕິກິຣິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ໂພລິເມີໄດ້. ນອກຈາກນີ້, ເນື່ອງຈາກການຫຼຸດລົງໃນຈໍານວນຂອງການຫມູນໃຊ້ກັບຕົວແທນທີ່ໄດ້, ການຫຼຸດຜ່ອນທີ່ໃຊ້ເວລາຂອງການສໍາຫຼວດດັ່ງກ່າວ, ມັນ simplifies ຂະບວນການ, ການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເປັນໄປຂອງຄວາມຜິດພາດໄດ້. PCR ຍັງອະນຸຍາດໃຫ້ທ່ານສາມາດລະບຸຈໍານວນໃນເບື້ອງຕົ້ນຂອງການສໍາເນົາຂອງ DNA ຂອງເຊື້ອພະຍາດດັ່ງກ່າວໃນການທົດລອງທາງດ້ານການຊ່ວຍເພື່ອຊ່ວຍລະບຸໄລຍະເວລາຂອງ exacerbations ແລະກຽມພ້ອມຮັບມືໃຫ້ທັນເວລາເພື່ອປິ່ນປົວຄົນເຈັບ.

ໃນມື້ນີ້, ມີຈໍານວນຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງວິທີການຂະຫຍາຍຂອງ fixation ໃນທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງ. ເຕັກນິກຕ່າງໆທີ່ໃຊ້ກັນທົ່ວໄປຫຼາຍທີ່ສຸດກໍາລັງສະຫມັກສໍາພັນ amplicon ກັບ probes Fluorogenic, ຄວາມຫນາແຫນ້ນລັງສີຂອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນໂດຍອີງຕາມການສະສົມຂອງ amplicon ແລະບັນທຶກໄວ້ໃນທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງໂດຍວິທີການຂອງອຸປະກອນພິເສດເອີ້ນວ່າ thermocycler ທີ່ມີລະຫັດ optical. ມັນສະຫນອງໃນລະດັບສູງຂອງຄວາມໄວຂອງການວິເຄາະໄດ້. ໃນຜະລິດຕະພັນສໍາເລັດໂຄງດຽວກັນສາມາດໄດ້ຮັບການພົບ, ຄຽງຄູ່ກັບປະລິມານຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງຜະລິດຕະພັນ, ໃນເວລານັ້ນໃນເວລາທີ່ການນໍາໃຊ້ electrophoresis ໃນບາງກໍລະນີບໍ່ໄດ້ສັງເກດເຫັນ.

ໂດຍ PCR ໃຊ້ຕົວຢ່າງການຄວບຄຸມບວກແລະທາງລົບໃນທີ່ໃຊ້ເວລາທີ່ແທ້ຈິງ. ດັ່ງນັ້ນ, ຕົວຢ່າງໃນທາງບວກແລະທາງລົບໃນການສຶກສາວິເຄາະເປັນຕົວຢ່າງແຍກຕ່າງຫາກ, ເປັນຕົວຢ່າງການຄວບຄຸມ wherein ຖືກນໍາສະເຫນີໃນແຕ່ລະຕົວຢ່າງເຊັ່ນແລະຜ່ານຂັ້ນຕອນການວິເຄາະທັງຫມົດ.

ໃນມື້ນີ້, ມີຈໍານວນຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງອຸປະກອນເພື່ອປະຕິບັດ ຕິກິຣິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ໂພລິເມີໄດ້. ເຫຼົ່ານີ້ປະກອບດ້ວຍຊີວະພາບ Rad, Applied Biosystems, CEPHEID ແລະ Roche. ພວກເຂົາແຕ່ລະມີຄວາມໄດ້ປຽບແລະຂໍ້ເສຍ

ຄວນຈະໄດ້ຮັບຍົກໃຫ້ເຫັນວ່າສໍາເລັດໂຄງ - ວິທີການຂອງການບົ່ງມະຕິທີ່ໃຊ້ໃນຂະຫນາດໃຫຍ່ວິທະຍາສາດ, ການຄົ້ນຄວ້າແລະສູນການບົ່ງມະຕິໃນທົ່ວໂລກໄດ້, ເນື່ອງຈາກວ່າມັນເຮັດໃຫ້ໂອກາດທີ່ຈະປະຕິບັດການຕີລາຄາທັນທີທັນໃດຂອງຜົນໄດ້ຮັບ.